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O753-1L Orchid multiplication medium

O753-1L Orchid multiplication medium

4,25 €
4,25 € par dose
Expédition les lundi et mercredi midi. Livraison 24/48h en France, 48/72h en Europe, 7/10 jours ailleurs.

Milieu destiné au clonage d'orchidées épiphyte ou terrestres en sachet pré-dosé pour la préparation de 1L

Voir en bas de page pour la préparation, le choix de vos milieux et le semis.

Proposé en dosage groupé pour un coût plus faible ou en sachets unitaires pour ceux qui ne souhaitent pas peser eux même

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Sachet
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O753-1L Orchid multiplication medium

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Milieu destiné au clonage d'orchidées épiphyte ou terrestres

S'utilise à hauteur de 32.30 g/l de milieu.

Contient :

  • Ammonium Nitrate 825
  • Boric Acid 3.1
  • Calcium Chloride, Anhydrous 166
  • Cobalt Chloride•6H2O 0.0125
  • Cupric Sulfate•5H2O 0.0125
  • Na2 EDTA•2H2O 37.3
  • Ferrous Sulfate•7H2O 27.85
  • Magnesium Sulfate, Anhydrous 90.35
  • Manganese Sulfate•H2O 8.45
  • Molybdic Acid, Sodium Salt•2H2O 0.125
  • Potassium Iodide 0.415
  • Potassium Nitrate 950
  • Potassium Phosphate, Monobasic 85
  • Zinc Sulfate•7H2O 5.3
  • 6-Benzylaminopurine (BA) 2.0
  • MES (Free Acid) 1000
  • myo-Inositol 100
  • α-Naphthaleneacetic Acid 0.5
  • Nicotinic Acid (Free Acid) 0.5
  • Peptone from Meat 2000
  • Pyridoxine•HCl 0.5
  • Sucrose 20,000
  • Thiamine•HCl 1
  • Agar 7

 

A conserver au réfrigérateur

FDS O753

Fiche de données de sécurité du O753

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Protocole Semis

 

Notice de semis / repiquage

 

 

Matériel nécessaire :

  1. De l’hypochlorite de calcium
  2. 2 flacons de 100 ml mini
  3. Une balance de cuisine
  4. Un entonnoir de cuisine
  5. Des filtres à café
  6. De l’eau de javel
  7. Un pulvérisateur
  8. Une glovebox (Voir notre fiche de construction dans le menu des milieux)
  9. Un ou des tubes à essais avec bouchon de fermeture
  10. Une spatule
  11. Une pipette
  12. De l’eau stérile (Optionnel)
  13. Un scalpel
  14. Une pince à épiler pour le repiquage uniquement.

 

Temps de préparation :

  1. 10 Min pour le matériel.
  2. 30 Min pour stériliser la Glovebox.
  3. 10-15 Min pour le semis et la finalisation.

 

 

Préparation de la solution d’hypochlorite de calcium :

  Attention ce produit est corrosif et dégage des vapeurs de chlore, utilisez le avec gants et lunettes de sécurité dans un endroit ventilé

Pesez 5g d’hypochlorite de calcium.

Diluez dans 100ml d’eau (Osmosée ou distillée) en agitant 5-10 min puis laissez décanter, la solution étant saturée, le trouble est normal.

Après 10 min de décantation filtrez la solution sur filtre à café en prenant soin d’entrainer le moins possible de dépôt qui se trouve au fond du flacon.

La solution finale appelée solution mère est utilisable 3-4 heures, pour sa conservation jusqu’à 1 semaine, disposez au réfrigérateur à l’abri de l’air et de la lumière.

Pour la désinfection des graines, utilisez 10Ml de solution mère diluée dans 100Ml d’eau pour les graines de Phalaenopsis et 20Ml pour les autres graines et la désinfection des capsules (« Semis en vert »), cette solution finale doit être préparée juste avant utilisation.

 

Préparation de la solution de désinfection de la glovebox :

  Attention ce produit est corrosif et dégage des vapeurs de chlore, utilisez le avec gants et lunettes de sécurité dans un endroit ventilé

Préparez une solution d’eau de javel diluée à 50% dans l’eau (Attention, toujours verser l’eau de javel dans l’eau et non l’inverse).

Disposez cette solution dans un pulvérisateur.

 

Préparation de votre matériel pour le semis :

Placez vos graines dans un tube et bouchez celui-ci avec un bouchon fritté ou un bouchon caoutchouc (Autant de tubes que de types de graines à semer, assurez-vous avant de ne pas saturer votre espace de travail, vos mouvements doivent rester libres).

En cas de « Semis en vert », placez votre capsule dans un flacon rempli de solution finale de désinfection et prévoyez un scalpel.

Préparez une spatule pour la récupération des graines dans vos tubes (Vérifiez au préalable que celle-ci est de taille adaptée à la taille de vos tubes).

Préparez une pipette pour l’aspiration de la solution de désinfection des graines ainsi que le flacon de solution finale de désinfection.

Préparez autant de pots de semis que vous l’estimez nécessaire.

Préparez votre pulvérisateur avec la solution de désinfection de la glovebox.

Si vous le souhaitez, vous pouvez ajouter un flacon d’eau stérile afin de rincer vos tubes et d’ajuster la quantité de liquide dans vos flacons.

 

 

Préparation de votre glovebox et semis :

Cette étape est primordiale, une bonne disposition de votre espace de travail vous permettra un travail sain et évitera des contaminations, gardez toujours en tête que vos mouvements doivent se limiter au maximum et se faire le moins possible au-dessus de vos flacons de semis ouverts. En cas de doute pour les débutants, n’hésitez pas à faire des simulations au préalable avec des pots vides et de tubes vides afin de trouver l’organisation qui vous convient.

Disposez le couvercle de votre glovebox sur votre espace de travail et recouvrez d’une couche de sopalin.

Pulvérisez ce sopalin avec votre solution de désinfection de la glovebox.

Placez y ensuite votre matériel listé ci-dessus en le pulvérisant de solution de désinfection de la box ainsi que  vos flacons et éventuellement l’eau stérile de façon à avoir un maximum de choses aux emplacements dont vous avez besoin.

Placez enfin le pulvérisateur à solution de désinfection de la glovebox ainsi que vos graines.

Retournez alors votre box sur son couvercle de façon à créer une enceinte close.

Introduisez alors vos bras dans les gants et pulvérisez l’ensemble de l’enceinte interne de votre box, laissez ensuite agir 30 Min.

Votre glovebox est maintenant stérile, répétez les opérations suivantes autant de fois que vous avez de boites et de graines.

  1. Pour semis en gaine :
    1. Pour chaque tube de graines, retirer le film alimentaire de vos boites, ouvrez les et reposez délicatement le couvercle dessus afin qu’elles soient prêtes à accueillir vos graines.
    2. Ouvrez ensuite le tube de graines et, à l’aide de la pipette, introduisez la solution finale de désinfection des graines (Les graines doivent être bien réparties dans la solution).
    3. Laissez alors agir 2 minutes en agitant toutes les 15-30 secondes.
    4. Repérez pendant cette phase si vos graines flottent ou coulent dans le liquide (L’ensemble des phases 3 et 4 ne doit pas excéder 3 min).
      1. Si les graines flottent, retournez alors le tube et évacuez le liquide en ouvrant doucement le bouchon, les graines vont progressivement rester collées sur la surface du tube.
      2. Si les graines coulent, laissez-les se déposer au fond puis inclinez délicatement le tube ouvert pour évacuer le liquide et récupérer les graines au fond.
  2. Pour « Semis en vert » :
    1. Pour chaque flacon de capsule, récupérez la capsule et ouvrez-la avec votre scalpel.
  3. Récupérez alors vos graines avec votre spatule et étalez les délicatement sur le milieu, reproduisez l’opération autant de fois que vous souhaitez faire de boites de semis.
  4. Si vous avez opté pour l’option Eau stérile, vous pouvez rinçer vos tubes de graines et ajuster l’eau dans vos boites à l’aide d’une pipette (Les graines ne doivent pas nager mais ne doivent pas être « à sec » sur le milieu.
  5. Fermez alors vos boites hermétiquement dès que votre semis est terminé et passez à la boite suivante.

Vous pouvez maintenant passer au semis suivant en prenant soin au préalable de rincer votre matériel (Scalpel et spatule) afin de ne pas faire de pollution croisée dans vos semis.

Attention dès que vous devez réintroduire du matériel dans la glovebox, l’opération de stérilisation de celle-ci doit être renouvelée.

Lorsque vos semis sont terminés, placer un film alimentaire sur vos boites afin d’en augmenter l’étanchéité.

 

Repiquage de protocormes et/ou plantules :

Cette opération se déroule comme pour le semis sauf qu’il n’est plus nécessaire de stériliser des graines, vous aurez pris soin d’ajouter une pince à votre matériel afin d’attraper les protocormes et/ou plantules et de les repiquer dans une nouvelle boite.

.

Choisir son milieu

 

 Orchidées Terrestres

 

Genre

Semis

Repiquage

Clonage

Aplectrum

K400

K400,K425

 

Arethusa

K400,P723

K400, K425, P748

 

Bletia

B138/B141, B142/B470, F522

P748, V895

 

Bletilla

P6681, P723

P668, P748

O753, P793

Calopogon

K400, P723

P723, P748

 

Calypso

B138/B141, B142/B140, F522

F522

 

Coeloglossum

K400

K400, K425, P748

 

Cymbidium

M5794, P7934

M579

 

Cypripedium

B142/B4702, F522, K4001,2, M5513, T8392, T8422, T8492

B138/B141, F522, K4001,2, P6681, T849

O753, P793

Dactylorhiza

F522

F522, P748

 

Epipactis

B142/B470

B138/B141, P668

 

Eulophia

P723, V895

P745, V895

 

Goodyera

M551, P6681, P723

P748

 

Gymnadenia

F522, M551, P6681

F522, M551, P748

 

Limodorum

B142

B142

 

Liparis

K400

K400, K425, P748

 

Oeceoclades

P6681, P723, V895

P723, V895

 

Ophrys

M551

M551

 

Orchis

F522, M551, P6681

F522, M551

 

Paphiopedilum

P6681,2

P6681, P668

 

Phragmipedium

P6681,2

P6681, P668

 

Plantanthera

F522, K400, L472, M551, P6681, P723

F522, M551, P723, P748

 

Pogonia

K400

K400

 

Habenaria

M551, P723

M551, P748

 

Sacolia

K400, M551

 

 

Spathoglottis

P723

P668, P723, P748

O753, P793

Spiranthes

K400, M551, P723

M551, P748

O753, P793

Thelymitra

P723, T839, T842

P748, T839, T842, T849

 

Tipularia

K400

K400, K425

 

Zeuxine

P723

P723, P748

 

1 Utilisé à dilution ½

2 additionné de 15% de coco

3 additionné de 10g/l de sucre ou 5g/l de S391 ou 5g/l de glucose

4 additionné de 2g/l de peptone

 

 

Orchidées Epiphytes

 

Genre

Semis

Repiquage

Clonage

Ascocenda

K400, P6681, P723, P785, V895

O156, P668

M507

Brassia

K400, K425, P723

K425, P748

 O753, P793

Cattleya

K400, K425, L472, P6681, P723, P785, V895

K400, K425, O1561, P6681, P748, P785

M507, O753 ,P793

Cytropodium

P723

P723, P748

 

Dendrobium

K400, K425, M579, V895

K400, K425, M579, V895

M507, O753, P793

Dendrophylax

P723

P723, P748

 

Encyclia

P723, P748

P748

 

Epidendrum

K400, K425, M579, P6681, P723, V895

K400, K425, O156, P668, P748, P785, V895

 

Gongora

K425, P723

K425, P748

 

Masdevallia

K400

 

 

Maxillaria

P723

P748

 

Oncidium

O1561, P6681, P723

O1561, P6681, P723, P748

M507, O753, P793

Odontoglossum

K400, K425, O1561, P723

K400, K425, O1561

 

Phalaenopsis

I365, K400, O156, P656, P6681, P723, P782, P785

I365, O156, P656, P668, P748, P785

M507, O753, P793

Pleurothalis

P668, P6681, P723

O156, O1561, P748

 

Prosthechea

P723

P723, P748

 

Rhynchostylis

P723, P6681

 

 

Schomburgkia

P723

P723, P748

 

Vanda

K400, M579, P723, P785, V895

M579, O156, P723, P748, V895

 

Vanilla

K400, K425

K400, K425, V895

 

1 Utilisé à dilution ½

P6681

Préparation Milieu

 

Notice de préparation de milieu

 

Matériel nécessaire :

  1. une casserole
  2. Une cocotte-minute ou un stérilisateur
  3. Un fouet
  4. Une louche
  5. 1L de O753 Soit 32.3g
  6. Un bol doseur
  7. Des pots de semis
  8. Des pansements pour orifice de respiration
  9. Du film alimentaire
  10. Une balance de précision 0.01g

 

Temps de préparation :

  1. 15 Min pour le milieu
  2. 60 à 80 Min pour la stérilisation

 

Préparation :

Pesez votre milieu (32.3g) .

Préparez une casserole suffisamment grande pour accueillir la dose de milieu à préparer.

Préparez  1L d’eau (Utilisez de l'eau osmosée ou distillée).

Versez 900ml dans le récipient de cuisson et tiédir.

Intégrez alors votre milieu et vos éventuels additifs.

Utilisez les 100ml d'eau restante pour récupérer les traces de milieu restées dans leur contenant.

Agitez alors au fouet jusqu'à ébullition douce et maintenir alors quelques minutes.

Vous pouvez alors couler votre milieu à la louche dans vos boites de semis (Approximativement 16 boites par litre de milieu).

Fermez alors vos boites sur lesquelles vous aurez préalablement fait un orifice de respiration et procédez à leur stérilisation comme suit :

  1. Dans votre cocotte-minute ou votre stérilisateur mettez un fond d'eau (100 à 200 ml), disposez vos boites en quinconce afin que la vapeur circule bien entre les boites.
  2. Chauffez jusqu'à ce que la soupape crépite légèrement.
  3. Maintenez alors ainsi 40Min à la cocotte-minute ou 30 Min au stérilisateur.
  4. Coupez alors le feu et laissez refroidir 40Min avant de sortir vos boites.
  5. Appliquez sur vos boites un film alimentaire pour étanchéifier au fur et à mesure de leur sortie.

Attendez alors une quinzaine de jours afin de vous assurer de l'absence de germes détectables par leur développement sur le milieu sous forme de mousse blanche ou colorée.

Vous êtes maintenant prêt à semer.

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