Reseña de preparación de medio

Material necesario:

1. Una cacerola
2. Una olla a presión o un esterilizador
3. Un látigo
4. Un cucharón
5. 1L de B141 Sea 26.22g
6. Un tazón dosificador
7. Potes de siembra
8. Curas para orificio de respiración
9. De la película alimentaria
10. Un equilibrio de precisión 0.01g

El tiempo de preparación:

1. 15 tipos de Min para el medio

2. 60 en 80 tipos de Min para la esterilización

Preparación:

Pese su medio (26.22g) .

Prepare una cacerola bastante grande para acoger la dosis de medio que hay que preparar.

Prepare 1L de agua (Utilice agua osmosée o destilada).

Vuelqúese 900ml en el recipiente de cocción y entibiar.

Integre entonces su medio y sus aditivos eventuales.

Utilice el 100ml de agua restante para recuperar los rastros de medio quedados en sus que contienen.

Agite entonces al látigo hasta ebullición dulce y mantener entonces algunos minutos.

Usted puede entonces vaciar(hundir) su medio al cucharón en vuestros (as) cojeas siembra (aproximadamente 16 cojeas por litro de medio).

Ciérrese entonces vuestros cojea sobre cuáles usted previamente habrá hecho un orificio de respiración y procede a su esterilización como sigue :

1. En su olla a presión o su esterilizador ponga un fondo de agua (100 - 200 ml), disponga vuestros cojeas al tresbolillo con el fin de que el vapor circule bien entre ellos(ellas) cojeas.
2. Caliéntese hasta que la válvula ligeramente crepite.
3. Mantenga entonces así 40Min a la olla a presión o 30 tipos de Min al esterilizador.
4. Corte entonces el fuego(luz) y deje enfriarse 40Min antes de salir vuestros cojeas.
5. Aplique sobre vuestros cojea una película alimentaria para étanchéifier a medida que su salida.

Espere entonces una quincena con el fin de asegurarle de la ausencia de gérmenes detectables por su desarrollo sobre el medio en forma de espuma blanca o coloreada.

Usted ahora está dispuesto a sembrar.

Reseña de siembra / trasplante

Material necesario :

1. Del hypochlorite de calcio
2. 2 frascos de 100 ml mini
3. Un equilibrio de cocina
4. Un embudo de cocina
5. Filtros a café
6. Lejía
7. Un pulverizador
8. Un glovebox (Ver nuestra ficha de construcción en el menú de los medios)
9. Uno o varios tubos de ensayo con corcho de cierre
10. Una espátula
11. Una pipeta
12. Agua estéri
13. Un escalpelo
14. Una pinzas de depilar para el trasplante únicamente.

El tiempo de preparación :

1. 10 tipos de Min para el material.
2. 30 tipos de Min para esterilizar Glovebox.
3. 10-15 tipos de Min para la siembra y la finalización.

Preparación de la solución de hypochlorite de calcio :

  Atención este producto es corrosivo y suelta vapores de cloro, utilice con guantes y gafas de seguridad en un lugar ventilado

Pese 5g de hypochlorite de calcio.

Diluez dans 100ml d’eau (Osmosée ou distillée) en agitant 5-10 min puis laissez décanter, la solution étant saturée, le trouble est normal.

Diluya en 100ml de agua (Osmosée o destilada) agitando 5-10 min luego deje decantar, la solución que es saturada, el disturbio es normal.

La solución final llamada solución madre es utilizable 3-4 horas, para su conservación hasta 1 semana, disponga en el frigorífico al amparo del aire y de la luz.

Para la desinfección de las semillas, utilice 10Ml de solución a madre diluida en 100Ml de agua para las semillas de Phalaenopsis y 20Ml para otras semillas y la desinfección de las cápsulas (" Siembra en verde "), esta solución final debe ser preparada antes de utilización.

Preparación de la solución de desinfección del glovebox :

  Atención este producto es corrosivo y suelta vapores de cloro, utilice con guantes y gafas de seguridad en un lugar ventilado

Prepare una solución de lejía diluida al 50 % en el agua (Atención, siempre pagar la lejía en el agua y no lo inverso).

Disponga de esta solución en un pulverizador.

Preparación de su material para la siembra :

Coloque sus semillas en un tubo y tape éste con un corcho fritté o un corcho caucho (Tantos tubos como tipos de semillas que hay que sembrar, asegúrese antes de no saturar su espacio de trabajo, sus movimientos deben quedar libres).

En caso de " Siembra en verde ", coloque su cápsula en un frasco lleno de solución final de desinfección y prevea un escalpelo.

Prepare una espátula para la recuperación de las semillas en sus tubos (Verifique previamente que ésta es capaz adaptada a la(lo) talla de sus tubos).

Prepare una pipeta para la aspiración de la solución de desinfección de las semillas así como el frasco de solución final de desinfección.

Prepare tantos potes de siembra como usted lo considera necesario.

Prepare su pulverizador con la solución de desinfección del glovebox.

Si usted lo desea, usted puede añadir un frasco de agua estéril con el fin de enjuagar su tubos y de ajustar la cantidad de líquido en su frascos.

Preparación de su glovebox y siembra :

Esta etapa es primordial, una buena disposición de su espacio de trabajo le permitirá un trabajo sano y evitará contaminaciones, guarde siempre en cabeza que sus movimientos deben limitarse como máximo y hacerse el menos posible por encima de sus frascos de siembras abiertas. En caso de duda para los principiantes, no vacile en hacer simulaciones previamente con potes vacíos y tubos vacíos con el fin de encontrar la organización que le conviene.

Disponga de la tapa de su glovebox sobre su espacio de trabajo y recubra con una capa de sopalin.

Pulverice este sopalin con su solución de desinfección del glovebox.

Coloque allí luego su material puesto en una lista más arriba pulverizándolo de solución de desinfección de boxearle así como sus frascos y eventualmente el agua estéril para tener un máximo de cosas en los emplazamientos los que usted necesita.

Coloque por fin el pulverizador a solución de desinfección del glovebox así como sus semillas.

Devuelva entonces a su garaje sobre su tapa para crear un recinto cerrado.

Introduzca entonces sus brazos en los guantes y pulverice el conjunto del recinto interno de su garaje, deje luego actuar 30 tipos de Min.

Su glovebox es ahora estéril, repita las operaciones siguientes tantas veces que usted tiene de cojeas y semillas.

1. Para siembra en vaina :
   1. Para cada tubo de semillas, retirar la película alimentaria de vuestros cojeas, abres y reposas delicadamente la tapa arriba con el fin de que estén dispuestas a acoger sus semillas.
   2. Abra luego el tubo de semillas y, con la ayuda de la pipeta, introduzca la solución final de desinfección de las semillas (Las semillas deben ser bien repartidas en la solución).
   3. Deje entonces actuar 2 minutos agitando cada 15-30 segundo.Repare durante esta fase si sus semillas flotan o fluyen por el líquido (El conjunto de las fases 3 y 4 no debe exceder 3 min).
   1. Si las semillas flotan, devuelva entonces el tubo y evacúes el líquido abriendo despacio el corcho, las semillas progresivamente van a quedar pegadas sobre la superficie del tubo.
   2. Si las semillas vacían, déjelas deponer al fondo luego incline delicadamente el tubo abierto para evacuar el líquido y recuperar las semillas al fondo.
2. Para " Siembra en verde " :
   1. Para cada frasco de cápsula, recupere la cápsula y ábrala con su escalpelo.
3. Recupere entonces sus semillas con su espátula y reparta delicadamente en el medio, reproduzca la operación tantas veces que usted desea hacer de cojeas siembra.
4. Si usted optó por la opción Agua estéril, usted puede rinçer su tubos de semillas y ajustar(apuntar) el agua en vuestros (as) cojeas con la ayuda de una pipeta(pipa pequeña) (Las semillas no deben nadar sino no deben estar " en seco " sobre el medio.
5. Ciérrese entonces vuestros cojea herméticamente tan pronto como su siembra se acaba y pase a ella cojea siguiente.

Usted puede ahora pasar a la siembra siguiente ocupándose previamente de enjuagar su material (Escalpelo y espátula) con el fin de no hacer contaminación cruzada en sus siembras.

Atención tan pronto como usted debe reintroducir del material en el glovebox, la operación de esterilización de ésta debe ser renovada.

Cuando sus siembras se acaban, colocar una película alimentaria sobre vuestras cojeas con el fin de aumentarlo la impermeabilidad.

Trasplante de protocormes yo plantules :

Esta operación se celebra como para la siembra excepto que no es necesario más esterilizar semillas, usted se habrá ocupado de añadir una garra a su material con el fin de coger el protocormes yo plantules y de repincharlos en una noticia cojea.